君意水平电泳槽
君意JY-SC10彗星电泳槽
君意JY-SC10彗星电泳槽设计单细胞凝胶电泳实验，是通过细胞基因组DNA损伤后产生的DNA碎片在凝胶电泳中形成彗星拖尾状条带图像，在单细胞水平上评估DNA损伤的程度、检测DNA损伤与修复等生物学过程。
设备名称：彗星电泳槽
制 造 商：北京君意东方电泳设备公司 产地：中国
品 牌：君意
型 号：JY-SC10
君意JY-SC10彗星电泳槽主要用于单细胞凝胶电泳（SCGE）实验，对细胞中的DNA基因组损伤的检测。
一、彗星电泳检测法的核心原理
彗星实验（Comet assay）也被称为单细胞凝胶电泳实验（Single cell gel electrophoresis，SCGE），是基于凝胶电泳中 DNA 分子的迁移差异，在单细胞水平上检测DNA损伤的技术。正常细胞基因组 DNA 以高度折叠的染色质形式存在于细胞核内，当各种内外源性 DNA 损伤因子诱发细胞DNA链断裂时，DNA超螺旋结构变得松散，部分DNA链脱离主螺旋结构变成小碎片。将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中，经裂解液破坏细胞膜与核膜、去除蛋白质等细胞组分后，暴露于电场中：细胞内的蛋白质、RNA 以及其他成分均扩散进入电泳缓冲液中。电泳过程中，完整的大分子DNA受凝胶基质阻碍，停留在原位，染色后呈圆形的荧光团，形成“彗星头部”，无拖尾出现。因DNA受损断裂生成的DNA碎片进入凝胶中，并在电场作用下，向阳极迁移，形成拖尾状的 “彗星尾部”。DNA受损越严重，断裂产生的碎片就越多、越小，则向阳极迁移的DNA碎片就越多，迁移距离也越长，荧光染色后就能看见“彗星”样尾部就越长、荧光强度越高。通过图像分析软件计算尾长、尾矩、尾部 DNA 占比等参数，即可有效评估DNA损伤的程度、评估DNA损伤与修复、细胞凋亡等生物学过程。
根据电泳缓冲液 pH 不同，彗星电泳实验检测分为中性彗星法与碱性彗星两种方式。在pH＞13碱性处理条件下，DNA发生变性，可同时检测单链断裂、双链断裂与碱不稳定位点在内的所有DNA 损伤，灵敏度更高，是目前科研中最常用的方案。在pH 约 8.0中性处理条件下，DNA 维持双链构象，主要检测 DNA 双链断裂，特异性强但灵敏度较低。
二、彗星电泳实验基本操作流程
1）细胞制备与处理
制备单细胞悬浮液，在 37℃条件下，悬浮液与低熔点琼脂糖混合；
2）细胞琼脂糖胶板制备
将琼脂糖、细胞混合物涂布在预处理的载玻片上；
将洁净的载玻片预先铺一层0.8% 正常熔点琼脂糖作为底胶，晾干备用；将细胞悬液与37℃预热的0.5%低熔点琼脂糖按1:10比例混匀，快速滴加到底胶上，加盖玻片后4℃静置，使胶层凝固。
3）玻片凝胶板中细胞裂解
移除盖玻片，将载玻片凝胶板浸入预冷新鲜配制的裂解液中，4℃避光裂解，确保细胞膜与核膜完全裂解，蛋白充分去除。
4）碱性解旋与电泳
将裂解后的载玻片取出沥干后放入水平电泳槽正极端，并排放置，加入新鲜碱性电泳缓冲液，液面没过胶面2mm，室温避光静置使DNA解链；设置电泳参数通常25V、300mA，4℃避光电泳分钟，电泳过程中避免缓冲液温度升高。
5）玻片凝胶板染色
电泳结束后取出载玻片，用 Tris-HCl 缓冲液 pH 7.5 中和载玻片，待LM琼脂糖完全干燥后，滴加核酸荧光染料覆盖胶面，室温避光染色 10~20 分钟，PBS漂洗去除多余染料。
6）成像分析
荧光显微镜下，每样本随机拍摄至少50个细胞的图像，用专用彗星分析软件，计算尾部 DNA 百分比、Olive 尾矩、尾长等核心参数，统计 DNA 损伤程度。
三、产品性能特点
底槽、槽盖均为黑色，具有避光功能，降低DNA样品被破坏。
可拆卸电极架，电极维修及更换更加方便快捷。开盖时自动切断电泳电场，确保操作安全。电源线接头与君意、Bio-Rad PowerPac系列电泳电源输出端兼容。
可选配冷却水循环器，以便保持电泳缓冲液处于较低状态。
标配2个载玻片托盘，每个托盘可安装5个载玻片，一次运行最大载玻片数量10片。
电泳槽外形尺寸（L×W×H）：365×165×55 mm。
最大缓冲液容量：400 mL。
净重：1.2 kg。
订购信息
品名 | 品牌 | 货号 | 规格 | 描述 | 报价 |
彗星电泳槽 | 君意 | JY-SC10 | 1套 | 10片容量彗星电泳槽套件，含电源线 | 询价 |
