伯乐新型双色实时荧光定量PCR仪CFX Duet隆重上市

      2022年5月25日，美国伯乐公司（Bio-Rad Laboratories）正式发布了CFX Duet Real-Time PCR System。

      CFX Duet系统配置有蓝450-490nm、绿515-535 nm两种LED荧光激发光源和绿515-530 nm（适用于FAM、SYBR Green I）、黄560-580 nm（适用于VIC,  HEX, CAL Fluor Gold 540, Cal Fluor Orange）两个荧光信号检测器，可在单一反应孔内连续采集2种PCR模板的荧光信号，实现一个反应同时测定2种靶标（target），如基因分型中野生型与突变型片段、多基因表达分析中的2种扩增序列等等。
       除可用于常规荧光染料、TaqMan一类水解荧光探针信号检测，CFX Duet还融合罗氏LightCycle双杂交探针（HybProbe Probes）专用检测通路，从而具备了TaqMan、LightCycle FRET探针两种分析应用能力。
由于它有这两方面的双重检测功能，又是伯乐CFX家族的新成员，故借用音乐二重奏（Duet）的概念，命名为CFX Duet。

Bio-Rad CFX Duet 、CFX Opus 96和CFX Connect技术性能的对比

型号	CFX Opus 96	CFX Duet	CFX Connect
仪器外形
操作控制方式	触摸屏控制 云平台远程控制 电脑联机控制	电脑联机控制
联机数据分析软件	CFX Maestro Software
检测通道配置	5荧光通道+1 FRET	2荧光通道+1 FRET
荧光信号测读方式	光梭移动至反应孔正上方逐孔采集荧光信号
检测灵敏度	单拷贝人基因组基因
检测动态范围	10数量级
热盖开盖方式
	抽屉式	抽屉式	铰链式
PCR样品通量	96×0.2mL （Low profile）
PCR升温速率	最快5℃/sec，平均3.3℃/sec
PCR控温精度	±0.2℃（target at 90℃）
PCR温度均一性	±0.4℃（10秒内达到90℃
退火温度梯度	1 ～ 24℃范围可任意设定

      CFX Duet 、CFX Opus 96和CFX Connect三款实时荧光定量PCR仪，PCR反应模块和荧光信号检测模式都相同，差异主要有三个方面。

1、热盖的启闭操作

将测试样品加载到PCR反应模块中或运行结束移走样品，首先需开启热盖。

CFX Connect热盖为半自动翻盖式设计，开盖需执行三个必须动作：

      首先在 CFX Maestro 软件“检测到的仪器”界面点击“Open Lid”；

      随后在软件“Start Run”选项卡上，单击“Open Lid”；

      最后是手动按下仪器正面开盖按钮。

而关闭热盖的操作顺序为：

      手工按下仪器上的热盖开盖按钮；

      在软件的“检测到的仪器” 界面点击“Close Lid”；

      在软件“Start Run”选项卡上单击“Close Lid”。

概括起来就是：系统执行关闭荧光模块、自动翻盖/关闭热盖之外，操作者手工完成热盖的机械解锁/锁定操作。

      而CFX Duet、CFX Opus 96的PCR热盖的启闭为水平伸缩滑动，主机上没有手动开启/关闭热盖按钮。启闭的热盖，通过Home(主屏幕) 、Run Setup( 运行设置) 或Run Status( 运行状态) 上按钮的点击Open/Close Lid，自动完成打开或关闭热盖。

      上样时，打开电动热盖的操作是：在Home界面点击Open Lid → 在Run Setup界面点击Open Lid即可。

      而关闭电动热盖的操作是：在Home界面点击Close Lid →在Run Setup界面点击Close Lid。

      与CFX Connect比，CFX Duet热盖操作自动化，更易于与机械臂整合，构建自动化检测平台。

2、仪器的操作控制

      CFX Duet 与CFX Connect须与本地电脑联机，通过CFX Maestro Software控制系统仪器运行和实验数据管理，均无法接入伯乐BR.io云平台。而CFX Opus 96不仅可以通过自带触摸屏控制单元独立运行，还可登录BR.io云端实现数据管理、分享和仪器的远程运行控制。

3、多重实时PCR功能

      CFX Duet 、CFX Connect均为双色荧光检测通路，而CFX Opus 96为5色荧光通道。在基于荧光探针qPCR应用中，CFX Duet只能检测2种荧光信号，可完成SNP基因分型及单孔内1个内参+1种模板的双重荧光定量分析（Duplex qPCR）。而CFX Opus 96则可胜任三重、四重这类多色荧光定量检测任务，这对于临床医学、流行病学中呼吸道、消化道感染性疾病复杂病原菌的快速鉴别极为有利。

       须说明，CFX Duet在多重定量分析的局限性只存在于荧光探针应用。若采用evaGreen、LC Green饱和荧光染料的高分辨率熔解曲线技术路线，CFX Duet完成多重定量分析的能力与多荧光通道机型间并无区别。

      CFX Duet反应模块最大变温速率高达5.0℃/秒，这在同档次进口品牌qPCR仪中已遥遥领先。

      至于CFX Duet实时荧光定量PCR仪的应用潜力，基于《美人首饰侯王印尽是沙中浪底来——牛人用伯乐CFX connect实时荧光定量PCR仪都干了啥？》的调研结论，我们深信：CFX Duet此番荣耀登场，也必将技惊四座，赢得满堂喝彩！