操作规程
eppendorf Himac CP100NX超速离心机开顶管管盖安装说明
Himac CP100NX、CP90NX及CP80NX立式超速离心机P100AT2、P90AT/P80AT/P70AT2、P70AT/P50AT2和P45AT角转头配套使用开顶管时,按操作指南要求,需为离心管加盖密封以确保离心样品安全。与Beckman open-top开口管用的管盖组件(Cap Assembly)比,Himac品牌开顶管用的管盖(cap),从结构设计、工作原理、配套工具的使用方法,都有异曲同工之妙(详情可参考《Open-top开口超速离心管的选择及使用方法说明》)。此外,Himac也是按工作容量不同,将常用开顶管分成5.0 - 100mL中容量管和4mL以内微量管两类。而这两类离心管密封盖安装操作流程是不同的。兹根据eppendorf官方资料分别予以说明。
一、5mL及以上标准离心管管盖的安装
Himac品牌中等工作容量开顶管包括了5mL、6.5mL、12mL、40mL、94mL共5种规格,管径介于13 - 38mm之间,共同之处是管盖组件中的阀杆直径一致,适用的压帽六角螺母及螺母扳手、位于阀杆正中内壁带螺纹的物料与气体进出通道、控制通道启闭用的定位螺钉(setscrew)和装卸定位螺钉用的工具自然是通用的。
不同容量开顶管配套的管帽直径大小不一,而管帽安装时须使用固定管帽的钳台(Tube Vise)。Himac可提供Tube Vise F、Tube Vise E、Tube Vise C和Tube Vise B四种型号的钳台,分别对应于94mL、40mL、12mL和5mL/6.5mL开顶管盖。钳台属转头可选组件,须与相应规格的管帽配套使用(详情参考:CP100NX超速离心机开顶管盖安装工具 )。
● 物料与工具准备
1.1 准备好离心管、管盖组件、管盖螺丝刀B(Tube setter B,作用相当于Beckman离心机提供的Removal Tools)、管盖拧紧工具(扭力扳手Torque wrench,或套筒扳手Box wrench);
1.2 转动手柄(B)将离心管钳台固定在实验台边缘上,并松开手柄A。
● 组装管盖
1.3 将管盖松散地组装起来,用管盖设定器细长的六角扳手(hex wrench)端拧下定位螺钉(setscrew),打开样品填充和排气通道;
1.4 将注射器经管盖组件正中的通道装填样品,样品填充至离心管容量的四分之三;
1.5 将管盖阀杆插入管中后下压管盖,直到离心管壁顶端与管帽形成良好接触;
1.6 手动拧紧管盖六角螺母。
● 拧紧管盖
1.7 将离心管和管盖插入离心管钳台(tube vice)固定孔中。调整管的位置,确保管帽的顶部和钳台台面平齐;
1.8 拧紧离心管钳台的手柄A以固定离心管和管盖。当使用的是带制动器(stopper)的管钳时,注意转动管盖使管盖阀杆顶部的狭缝,将制动器引入阀杆狭缝中。这样可确保拧紧管盖螺母时,离心管和阀杆不随之转动;
1.9 根据制不同管盖组件指定的拧紧设计要求,用扭力扳手、六角扳手或套筒扳手拧紧管盖上的螺母(使用带制动器的管钳时,六角扳手转动螺母更方便);
不同规格离心管管帽螺钉工作扭矩参考表
管盖货号 | 管盖型号 | 适用的离心管 | 拧紧螺母扭矩值 |
5720411225 | F2-AL Cap | 94mL tube: 94PP, 94PC and 94SS Tube | 8 N•m |
5720411212 | E3-AL Cap | 40mL tube: 40PP,40PE,40PET Tube | 6 N•m |
5720411223 | E4-AL Cap | 40PE tube: used only for a 40PE tube | 6 N•m |
5720411211 | C-TI Cap | 12 mL tube: 12PP,12PC,12PE,12Tia,12SS Tube | 10 N•m |
- | B2-TI Cap | 6.5 mL tube | 10 N•m |
5720411202 | B-TI Cap | 6.5 mL tube 6.5PP Tube,6.5PC Tube | - |
备注:1 N۰m = 10.2kgf۰cm |
1.10 松开管钳的手柄A,用管盖螺丝刀的带螺纹较粗的一头拧入阀杆中心孔后取下离心管;
● 离心管样品重量的配平
1.11 用注射器从管盖样品通道进一步填充样品;
1.12 将对称布置的任意两根离心管的总重量差值控制在0.3g以内;
1.13 用管盖螺丝刀细端扳手牢固地拧紧固定螺钉,封闭阀杆通道,以防止样品和气体泄漏。
二、4mL及以下离心管的管盖安装
Himac的微量开顶管,即工作容量4mL的4PP Tube、3mL的3PP Tube,适用于P90AT、P80AT和P70AT2三款角转头,配套管盖为A3-AL Cap。
5mL及以上的常量离心管管盖中心设有样品通道,因此样品装填过程经历的是预装3/4体积样品→安装管盖→继续填充样品精确配平→管盖密封共四个步骤。
3-4mL开顶管管径仅11mm,不具有标准阀杆定位螺钉安装条件。因此,微量开顶管管盖无液体通道,管盖安装不再需要装卸定位螺钉的操作。离心管样品装填、管重量配平操作,必须在管盖安装前完成。微量管样品的装填过程简化为装样→称重配平→管盖安装三个步骤。
● 物料与工具准备
2.1 准备好离心管、配套管盖组件、离心管钳台、套筒扳手;
2.2 转动手柄(B)将离心管钳台固定在实验台边缘上,并松开手柄A。
● 离心管填充样品
2.3 用样品装填离心管直至弧形液面中心距离管顶部5mm高度;
● 组装管盖
2.4 将管盖底部朝上,旋转管帽,使阀杆和管帽的标记线对齐后并用手拧紧螺母;
● 离心管重量配平
2.5 将离心管、管盖同时放在天平上,调整液体装填量,确保对称排列的任意两根离心管及样品总重量误差在0.3g以内,完成配平操作;
● 安装管盖
2.6 将管盖安装到离心管上,压下管盖,直到离心管与管帽接触;
2.7 用套筒扳手拧紧管盖六角螺母;
● 拧紧管盖
2.8 将离心管和管盖组合体插入管钳的孔中并固定;
2.9 用套筒扳手将管盖螺母拧紧;
2.10 徒手从管钳上取下离心管,完成管盖安装。
主要参考文献:
Rotors, Tubes, Bottles And Caps Instruction Manual for Ultracentrifuge(S99920420)