Himac CP100NX超速离心机热封管封口操作说明

        eppendorf Himac公司出品的STF3封管机（Tube Sealer）利用PA材料热塑性特征，利用密封管帽将细长管口加热到热变形温度以上质熔点温度之间，使材料充分软化并具有一定流动性，体积膨胀的材料在管帽和管内气压双重压力下，将管口断面重塑形成圆帽而封闭管口。密封处理后的离心管可用于 Himac CP100NX、CP90NX、CP80NX和CS150NX系列超速离心机的固定角转子、垂直转子和近垂直转头离心。

        与Beckman Optima系列超速离心机采用的Cordless Tube Topper热封器，STF3采用专用管架批量载入离心管，一次可处理多达8只热封管。操作所需工作部件简单，热封时间和受热部位可控性好，操作简便，密封质量和效率更高。

一、材料与工具

       热封管

       热封管配套管架

       STF3封管机（200-240V）或STF2

       重量配平天平（可读性0.01g）

       移液器或注射器

二、封管操作流程

2.1 离心管样品装填

       热封管由管身、管肩和管颈三部分组成。

       样品装填时，取注射器经管颈部深入管肩以下位置，将样品注入离心管中，液面高度达到管肩-管颈交界处时停止加样，以留足下一步样品管配平移液所需容量空间，并确保热封管颈部保留少量空气。

       不连续密度梯度离心梯度介质分层加样，应按先低密度层、后高密度层、最后是待分离样品的顺序进行液体的装填。具体操作是用移液器吸取适量低密度介质溶在管底中心缓慢释放，再吸取更高梯度浓度的介质层液体穿透前面低密度介质层、在管底铺设。不同浓度梯度介质自身密度不同，而密度较低介质层被高密度介质层平缓均匀抬升，形成上低下高的密度分层。以此方法，完成全部所需梯度介质的铺设，可有效防止移液过程中梯度介质层因湍流和对流干扰造成梯度密度层紊乱。

       连续密度梯度离心是通过将固定密度梯度介质层添加后通过长时间静置、利用梯度介质层间液体对流来实现连续密度梯度分布，故其梯度介质加样操作手法和要求相对简单。 

2.2 离心管配平

       离心管重量的配平，是指将拟安装于离心机转头对称位置的两个离心管，通过精细调整管内样品容量的办法，使样品管工作重量保持一致，以避免转头工作时两侧承受的作用力不平衡而造成损坏。通常用样品电子天平称重法。将离心管竖直固定于天平中，继续往管内加样，直至两个离心管总重量的差值控制在0.3g以内（使用 CP-NX系列离心机时，将样品管液面高度误差调整到5mm以内即可达到平衡目的）为止。

       离心管密封前管内残留空气过多，容易因气泡上浮移动干扰、破坏管内密度梯度条带的成形，并可能因管壁局部缺少液体有效支撑而变形。因此，配平阶段的操作除了要控制样品管重量均衡，另一个重要功能是要调整和有效控制离心管内样品液面的高度。当发现装填样品后的液面距离管肩、颈交界部存在高差时，应进一步填充样品以驱除多余空气。

2.3 密封离心管

       样品管配平结束后，应检查以管颈内壁是否有液滴吸附。可用注射器或移液管吸走附壁及多余液体。或用无绒纸巾擦去管颈内粘附的水珠，使之处于干燥状态；

       将离心管装入相应规格的管架中；

       将管架载入STF3封管机底座上的管架导轨上，移动管架位置，使第一支离心管的管颈移动到封管机加热器正下方的位置；

       按下封管机操作手柄直到加热器压住离心管的颈部，在此状态保持2 - 3秒种后，将手柄向下拉到底并保持，直至HEAT Lamp 熄灭为止。

       用指甲去除热封部位的管材溢出物，并轻推管颈部，检查样品是否泄漏。

       正常情况下，单支离心管密封耗时约需 40 秒即可完成。

主要参考文献：

Rotors, Tubes, Bottles And Caps Instruction Manual for Ultracentrifuge (S99920420)

Rotors And Tubes Instruction Manual for Micro Ultracentrifuge (S99927635)

Use Rotors and Tubes Instruction For Beckman Coulter Preparative Ultracentrifuges (LR-IM-24AK)