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操作规程
ABI Veriti 梯度PCR仪基本操作规程
1. 打开PCR仪热盖,插入0.2ml的样品管,盖好热盖。
2. 打开PCR仪电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟;初始化完成后,显示主菜单。
3. 点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表。
4.可直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可选择不同的文件夹。
5. 若要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:
1)添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,将加入一段新的程序。2)修改循环次数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。
3)添加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。
4)删除一个步骤:点“Step”位置,再点“Delete”,软件将该步骤删除。
5)建立梯度模式:
a)点中一个步骤,再点“Option”键。
b)点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口:输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定(注意:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃)。
6)编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。
7)点“Run Method”,输入PCR程序名称;点,选择保存PCR程序的文件夹(若要保存在USB中,需先插U盘),再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行程序时可以修改)。点“SaveδExit”确定。
6. 回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序,点“Start Run”出现运行参数设置窗口:输入反应体积和热盖温度,点“Start Run Now”开始运行。
7. 仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口。
8. 暂停运行:点“Pause Run”,仪器暂停,出现暂停选项栏:“Remaining Time”显示暂停剩余时间,“ Elapse Time”显示已暂停时间。若要修改暂停时间,点,输入时间值,点“Done”确定;点“Resume Run”结束暂停,继续运行PCR程序。
9. 终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序。
10. 反应报告:PCR程序结束后,自动生成反应报告(可保存和打印),显示当次反应的各项指数。
11. PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。将仪器开盖放置,待热盖和加热模块降至室温后关上盖子。