ABI Veriti 梯度PCR仪基本操作规程

1. 打开PCR仪热盖，插入0.2ml的样品管，盖好热盖。

2. 打开PCR仪电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟；初始化完成后，显示主菜单。

3. 点“Browse/New Methods”，进入PCR程序列表。

4.可直接点一个PCR程序，选择“Start Run”运行；点右边的符号，可选择不同的文件夹。

5. 若要新建一个PCR程序，点“New”，出现PCR程序：

1)添加一段程序：点中上方的“Stage”位置，该位置变红；再点“Add”，将加入一段新的程序。2)修改循环次数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定。

3)添加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新的步骤。

4)删除一个步骤：点“Step”位置，再点“Delete”，软件将该步骤删除。

5)建立梯度模式：

a)点中一个步骤，再点“Option”键。

b)点“VeriFlex step”，出现梯度创建窗口：输入6个梯度温度，温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔，全部输好后，点“Done”确定（注意：相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃）。

6）编辑PCR程序完成后，点“Save”保存。

7）点“Run Method”，输入PCR程序名称；点，选择保存PCR程序的文件夹（若要保存在USB中，需先插U盘），再输入反应体积和热盖温度（这两项在运行程序时可以修改）。点“SaveδExit”确定。

6. 回到PCR程序列表界面，选择新建的PCR程序，点“Start Run”出现运行参数设置窗口：输入反应体积和热盖温度，点“Start Run Now”开始运行。

7. 仪器运行选中的PCR程序，显示运行监视窗口。

8. 暂停运行：点“Pause Run”，仪器暂停，出现暂停选项栏：“Remaining Time”显示暂停剩余时间，“ Elapse Time”显示已暂停时间。若要修改暂停时间，点，输入时间值，点“Done”确定；点“Resume    Run”结束暂停，继续运行PCR程序。

9. 终止运行：点“Stop”可以终止整个PCR程序。

10. 反应报告：PCR程序结束后，自动生成反应报告（可保存和打印），显示当次反应的各项指数。

11. PCR反应结束后，打开热盖，取出样品，关闭仪器电源。将仪器开盖放置，待热盖和加热模块降至室温后关上盖子。